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WYE-354

品牌：北京金优科技有限公司

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生物活性：	靶点：mTOR 通路：PI3K/Akt/mTOR 背景说明：WYE-354 是一种 ATP 竞争性的 mTOR 抑制剂。生物活性：WYE-354 是一种 ATP 竞争性的 mTOR 抑制剂, IC50 为 5 nM。WYE-354 也抑制 PI3Kα 和 PI3Kγ, IC50 分别为 1.89 μM 和 7.37 μM。WYE-354 抑制 mTORC1 和 mTORC2。[1-2] IC50：mTOR:5nM (IC50) PI3K alpha:1.89μM (IC50) PI3K gamma:7.37μM (IC50) [1-2] In Vitro：在测量His6-S6K1 T389磷酸化的DELFIA中，WYE-354抑制重组mTOR酶，IC50为5 nM [1]。通过MTS测定分析细胞活力。用递增浓度的WYE-354(0.1，1，5和10μM)处理G-415和TGBC-2TKB细胞系24，48和72小时。在两种研究的细胞系中，WYE-354在暴露24小时后从1μM浓度开始显着降低细胞活力(P <0.001)。除了治疗72小时后的TGBC-2TKB细胞系外，在100nM的剂量下未观察到细胞活力的降低[2]。 In Vivo：在异种移植GBC肿瘤模型中评估雷帕霉素和WYE-354对肿瘤生长的影响。分别将2×106或5×106个G-415或TGBC2TKB细胞皮下移植到NOD-SCID小鼠中。当肿瘤达到100mm 3的平均体积时，用雷帕霉素或WYE354处理小鼠。雷帕霉素以10mg / kg的浓度腹膜内施用，每天施用，每周5天，持续3周，而WYE-354以50mg / kg的每日ip剂量施用，持续5天。在开始治疗后30天处死小鼠并进行尸检，包括移除整个肿瘤区域。用WYE-354处理的小鼠的平均肿瘤大小分别减少68.6％和52.4％(P <0.01; P <0.01)，肿瘤重量分别减少82.9％和45.5％(P <0.01; ns)[2] ]。细胞实验：将G-415和TGBC-2TKB细胞系以每孔2×103个细胞的密度接种到96孔板上。过夜连接后，用WYE-354处理细胞。使用CellTiter 96 Aqueous One Solution Cell Proliferation assay以一定间隔测定活细胞数。向每个孔中加入20μLCellTiter96溶液，将板孵育2小时，然后使用多孔板读数器在490nm波长下读取每个孔的吸光度。所有测定均以一式五份进行，每次测定重复三次[2]。动物实验：小鼠[2]将8至12周龄的NOD-SCID小鼠分别在一侧腹部皮下注射2×106或5×106细胞的G-415或TGBC2TKB，并重悬于200μL含有PBS的小鼠中。 30％的Matrigel。当平均肿瘤达到100mm 3时，将小鼠随机分成四组，并用雷帕霉素或WYE-354及其各自的载体处理。雷帕霉素以每天10mg / kg的腹膜内(ip)剂量施用，每周5天，持续3周，而WYE-354以50mg / kg的每日ip剂量施用，持续5天。肿瘤体积估计每周两次。激酶实验：常规抑制剂测定在96孔板中在室温下在25μL中进行2小时，所述25μL含有6nM Flag-TOR(3.5)(估计5-10％纯度)，1μMHis6-6SK和100μMATP。使用Euphospho-p70S6K T389抗体，通过DELFIA进行测定和检测。一些测定使用商业购买的一批mTOR。对于抑制剂与ATP基质竞争，mTOR激酶反应用不同浓度的ATP(0，25，50-100，200，400和800μM)与不同浓度的抑制剂组合进行。该测定包含12nM Flag-TOR(3.5)，1μMHis-S6K并孵育30分钟。 DELFIA对检测结果进行了类似的检测，并进行了处理以生成双倒数图[1]。数据来源文献：[1]. Yu K et al. Biochemical， cellular， and in vivo activity of novel ATP-competitive and selective inhibitors of the mammalian target of rapamycin. Cancer Res. 2009 Aug 1; 69 (15) :6232-40. [2]. Weber H， et al. Rapamycin and WYE-354 suppress human gallbladder cancer xenografts in mice. Oncotarget. 2015 Oct 13; 6 (31) :31877-88
其它标识：	MDL：MFCD18074514 SMILES：COC(NC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(C(N4CCOCC4)=N2)C=NN3C5CCN(CC5)C(OC)=O)=O
基本信息：	CAS：1062169-56-5 英文名称：WYE-354 别名：;pyrazolopyrimidine，19;WYE354; 分子式：C₂₄H₂₉N₇O₅ 分子量：495.53 规格：10mg ; 50mg ; 5mg 溶解性：Soluble in DMSO 纯度：≥98% 外观(性状)：White to off-white Solid 储存条件：Powder:-20℃，2 years;Insolvent(母液):-20℃，6 months;-80℃，1 year
靶点：	mTOR

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WYE-354 是一种 ATP 竞争性的 mTOR 抑制剂

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