靶点：c-Met/HGFR 通路：Protein Tyrosine Kinase/RTK 背景说明：BMS 777607 是一种 Met-related 抑制剂。 生物活性：BMS 777607 是一种 Met-related 抑制剂，能够抑制 c-Met，Axl，Ron 和 Tyro3 的活性，IC50 值为 3.9 nM，1.1 nM，1.8 nM 和 4.3 nM[1-3]。 IC50：3.9nM(c-Met)，1.1nM(Axl)，1.8nM(Ron)，4.3nM(Tyro3)[1-3] In Vitro：BMS 777607是一种选择性ATP竞争性Met激酶抑制剂，有效阻断c-Met的自身磷酸化，在GTL-16细胞裂解液中IC50为20 nM，并证明在Met驱动的肿瘤细胞系(如GTL-)中选择性抑制增殖。 16细胞系，H1993和U87 [1]。 BMS 777607在PC-3和DU145前列腺癌细胞中抑制肝细胞生长因子(HGF)- 触发的c-Met自身磷酸化，IC50 <1 nM。 BMS 777607对肿瘤细胞生长几乎没有影响，但对PC-3和DU145细胞中HGF诱导的细胞散射具有抑制作用，在0.5μM时几乎完全抑制。 BMS 777607还在两种细胞系中以剂量依赖性方式(IC50 <0.1μM)抑制受刺激的细胞迁移和侵袭[2]。将BMS 777607(约10μM)应用于高转移性小鼠KHT细胞2小时有效消除了基因水平的自身磷酸化c-Met，IC50为10 nM而不影响总c-Met，导致剂量依赖性抑制磷酸化。下游信号分子包括ERK，Akt，p70S6K和S6。用BMS 777607(约1μM)处理24小时有效抑制KM细胞在纳摩尔范围内的剂量分散，运动和侵袭，其中包括MET基因敲低，并且适度地影响细胞增殖和集落形成[3]。 In Vivo：BMS 777607(6.25-50 mg/kg)的口服给药显著降低了无胸腺小鼠中GTL-16人肿瘤异种移植物的肿瘤体积，没有观察到毒性[1]。给予BMS 777607(25 mg/kg /天)可减少KHT肺肿瘤结节数(28.3％)，改善形态学出血，并显著损害注射的6-8周龄雌性C3H/HeJ小鼠的转移表型与对照治疗相比，啮齿动物纤维肉瘤KHT细胞没有明显的全身毒性。与载体对照相比，低剂量的BMS 777607(10 mg/kg)也对肺结节形成有轻微但不显著的抑制作用[3]。 细胞实验：将KHT细胞暴露于BMS 777607的连续稀释96小时，然后MTT测定和台盼蓝排除分别用于测定细胞增殖和细胞死亡。将KHT细胞集落与BMS 777607一起温育24小时，然后用结晶紫(0.1％)染色并拍照以评估细胞散射。汇合的KHT细胞单层上的2mm划痕使用灭菌的1mL移液管尖端，然后用BMS 777607处理24小时，然后迁移到裸露区域的细胞数在4个随机区域上计数用于评估细胞迁移。为了检查细胞侵袭，将预载有基质胶的商业transwell插入物(8μM孔膜)在无BMS 777607存在或不存在下在37℃下与无血清培养基一起温育2小时，以允许Matrigel再水合。然后将悬浮在无血清培养基中的细胞加载到顶室(5×103 /插入物)上，并在下室中使用完全培养基(含有10％FBS)作为化学引诱物。温育24小时后，除去基质胶，用结晶紫染色插入物。对过滤器下侧的侵入细胞进行拍照并计数。 动物实验：BMS 777607的pharemacokinetics在男性Balb/C小鼠中表征。将两组动物(每组N = 6，20-25g)禁食过夜，并通过尾静脉或管饲法(10mg/kg)接受BMS 777607静脉内(IV)推注剂量(5mg/kg)。)。给药后6小时喂养小鼠。通过眼眶后出血以0.05(或口服0.25)，给药后0.5，1，3，6，8和24小时获得血样(约0.2mL)。在每组中，一半的动物以0.05(或口服0.25)，1，6和24小时放血，另一半在0.5，3和8小时放血，产生复合药代动力学曲线(每只3只小鼠)时间点)。使血液样品凝固并在4℃(1500-2000×g)下离心以获得血清。将血清样品储存在20℃，直至通过LC/MS/MS分析。 数据来源文献：[1]. Schroeder GM， et al. Discovery of N-(4-(2-amino-3-chloropyridin-4-yloxy)-3-fluorophenyl)-4-ethoxy-1-(4-fluorophenyl)-2-oxo-1，2-dihydropyridine-3-carboxamide (BMS-777607)， a selective and orally efficacious inhibitor of the Met kinase superfamily. J Med Ch [2]. Dai Y， et al. BMS-777607， a small-molecule met kinase inhibitor， suppresses hepatocyte growth factor-stimulated prostate cancer metastatic phenotype in vitro. Mol Cancer Ther， 2010， 9(6)， 1554-1561. [3]. Dai Y， et al. Impact of the small molecule Met inhibitor BMS-777607 on the metastatic process in a rodent tumor model with constitutive c-Met activation. Clin Exp Metastasis， 2012， 29， 253-261
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