靶点：PKC 通路：TGF-beta/Smad;Epigenetics 背景说明：Chelerythrine Chloride 是一种 PKC抑制剂。 生物活性：Chelerythrine Chloride 是一种有效，可渗透细胞的蛋白酶 C (protein kinase C) 抑制剂，能够抑制 PKC 活性，IC50 值为 660 nM。[1-5] In Vitro：白屈菜红碱抑制BclXL-Bak BH3肽结合，IC50为1.5μM，并取代BclXL中含有BH3的蛋白质Bax。用白屈菜红碱处理的哺乳动物细胞经历细胞凋亡，其特征在于线粒体途径的参与[1]。白屈菜红碱处理通过选择性抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和细胞外信号调节蛋白激酶1和2(ERK1/2)激活，抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞中LPS诱导的TNF-α水平和NO产生。此外，白屈菜红碱对NO和细胞因子TNF-α产生的影响可能可以通过p38 MAPK和ERK1/2在调节炎症介质表达中的作用来解释[2]。白屈菜红碱对人单核细胞白血病细胞具有细胞毒作用，LD50值为3.46μM。 LPS刺激后2小时，受血根碱和白屈菜红碱影响的细胞使CCL-2表达显著下降3.5和1.9 [3]。白屈菜红碱以剂量依赖性方式显著增强ERK1/2的磷酸化。此外，白屈菜红碱抑制p38的磷酸化[4]。 In Vivo：白屈菜红碱通过抑制LPS诱导的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和血清中一氧化氮(NO)的产生，在体内实验诱导的小鼠内毒素休克模型中显示出显著的抗炎作用[2]。白屈菜红碱氯化物(5mg/kg /天，ip)诱导RCC细胞凋亡而对小鼠没有显著毒性。白屈菜红碱治疗导致p53的剂量依赖性积累[4]。 细胞实验：通过MTT测定评估细胞活力。将100μL培养基中的细胞(2×103 HEK-293细胞/孔和3×103 SW-839细胞/孔)接种到96孔板中，并孵育12小时。接下来，用含有各种浓度的白屈菜红碱的培养基替换每个孔中的培养基，并将细胞在37℃下再培养24和48小时。随后，向每个孔中加入20μLMTT(5mg/mL)。在37℃下另外温育4小时后，除去上清液，并向每个孔中加入100μLDMSO。使用iMark 微孔板吸光度读数器测定吸光度值(在540nm处读数)。使用Microplate Manager软件(版本6.3; 1689520)分析数据。 动物实验：将总共5×106个SW-839细胞与Matrigel 混合，并皮下注射到14只5周龄雄性BALB/c裸鼠的侧腹中。将小鼠保持在18×30-cm笼中，每笼3只小鼠，温度为22℃，使用12小时光照/黑暗循环。食物和水随意提供。小鼠随机分为两组(n = 7)。如前所述，通过腹膜内注射给小鼠施用剂量为5mg/kg /天的白屈菜红碱氯化物5周，在注射SW-839细胞后第一次注射白屈菜红碱24小时。对照小鼠施用相同体积的含有1％DMSO的PBS。每周测量一次小鼠肿瘤的体积和重量。在切除肿瘤后，在接种癌细胞后36天处死所有小鼠。 数据来源文献：[1]. Chan， et al. Identification of chelerythrine as an inhibitor of BclXL function. J Biol Chem. 2003 Jun 6;278(23):20453-6. [2]. Li W， et al. Effect of Chelerythrine Against Endotoxic Shock in Mice and Its Modulation of Inflammatory Mediators in Peritoneal Macrophages Through the Modulation of Mitogen-Activated Protein Kinase (MAPK) Pathway. Inflammation. 2012 Jul 24. [3]. Pencikova K， et al. Investigation of sanguinarine and chelerythrine effects on LPS-induced inflammatory gene expression in THP-1 cell line. Phytomedicine. 2012 Jul 15;19(10):890-5. Epub 2012 May 14. [4]. Chen XM， et al. Chelerythrine chloride induces apoptosis in renal cancer HEK-293 and SW-839 cell lines. Oncol Lett. 2016 Jun;11(6):3917-3924 [5]. Herbert JM， et al. Chelerythrine is a potent and specific inhibitor of protein kinase C. Biochem Biophys Res Commun. 1990 Nov 15;172(3):993-9.
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