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钙离子探针Fluo-4AM

品牌：北京金优科技有限公司

货号	规格	包装/纯度	价格	货期	操作
JY-2025JR781mg	1mg	≥95%	¥4320.00 会员价请登录

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生物活性：	背景说明：Fluo-4 AM 是一种荧光染料 (λex=494 nm,λem=516 nm)。
其它标识：	SMILES：O=C(OCOC(C)=O)CN(C1=CC=C(C2=C3C=C(F)C(C=C3OC4=C2C=C(F)C(OCOC(C)=O)=C4)=O)C=C1OCCOC5=CC(C)=CC=C5N(CC(OCOC(C)=O)=O)CC(OCOC(C)=O)=O)CC(OCOC(C)=O)=O
理化性质：	Note：本产品为冻干粉形式，可能会粘附在管壁上，是正常现象，可放心使用。
基本信息：	CAS：273221-67-3 中文名称：钙离子探针Fluo-4AM 英文名称：Fluo-4AM 分子式：C₅₁H₅₀F₂N₂O₂₃ 分子量：1096.94 规格：100ug ; 1mg 溶解性：Soluble in DMSO 纯度：≥95% 外观(性状)：Orange Solid 储存条件：Powder:-20℃，1 year;Insolvent(母液):-20℃，6 months;-80℃，1 year

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Fluo-4 是一种将 Fluo-3 结构中的 Cl 替换成 F 的钙荧光探针。由于将 Cl 替换成了电子吸引力更强的 F，它的最大激发波长会向短波长处偏离 10 nm 左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo-4 的荧光强度比 Fluo-3 强一倍。 Fluo-4, AM 穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-4，从而被滞留在细胞内， Fluo-4 若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为 494nm，最大发射波长为 516nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

使用方法（仅供参考）：

用 HBSS 稀释 Fluo-4, AM 溶液，制备 4-5µM 的 Fluo-4, AM 工作液。
将 Fluo-4, AM 工作液加入细胞，在 37℃培养 20 分钟。
加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS，再继续培养 40 分钟。
用 HEPES buffer saline 洗涤细胞 3 次，然后用 HEPES buffer saline 使细胞重悬浮，制成 1×105 cells/mL 的溶液。
37℃下培养 10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长 506nm，发射波长 526nm。
*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。

注意事项： 1、如果使用含有血清的培养基，血清中的脂酶会分解 AM 体，从而降低 Fluo-4, AM 进入细胞的效果。
2、含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，所以加工作液之前，应该尽量去除培养基残留。
3、Pluronic F127 可以防止 Fluo-4,AM 在 HBSS 中聚合并能够帮助其进入细胞。可以向 Fluo-4,AM溶液中加入适量 Pluronic F127 溶液，但不建议在 Pluronic F127 中长期保存 Fluo-4,AM 溶液。
4、荧光染料均存在萃灭问题，请注意避光，以减缓荧光萃灭。

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