靶点：TNF-α;Ligand for E3 Ligase 通路：Apoptosis;Ubiquitin 背景说明：Lenalidomide是一种TNF-α分泌抑制剂；还是CRBN的配体，它通过CRBN-CRL4泛素连接酶引起两个淋巴样转录因子IKZF1和IKZF3的选择性泛素化和降解。 生物活性：Lenalidomide是用作免疫调节药物的 TNF-α 抑制剂。它还具有抗血管生成活性。[1-6] In Vitro：来那度胺在刺激T细胞增殖和IFN-γ和IL-2产生方面是有效的。来那度胺已被证明可抑制促炎性细胞因子TNF-α，IL-1，IL-6，IL-12的产生，并提高人PBMC中抗炎细胞因子IL-10的产生。来那度胺可直接下调IL-6的产生，也可通过抑制多发性骨髓瘤（MM）细胞和骨髓基质细胞（BMSC）相互作用来增加骨髓瘤细胞的凋亡[2]。用沙利度胺，来那度胺和Pomalidomide观察剂量依赖性与CRBN-DDB1复合物的相互作用，IC50值分别为~30μM，~3μM和~3μM，这些CRBN表达细胞减少（U266-CRBN60和U266-CRBN75） ）对于抗增殖作用，Lenalidomide的反应性反应范围为0.01至10μM，对亲代细胞的反应性较低[3]。来那度胺，一种沙利度胺类似物，作为人类E3泛素连接酶脑和CKIα之间的分子胶，可以诱导该激酶的泛素化和降解，因此可能通过p53激活杀死白血病细胞[5]。 In Vivo：通过IV，IP和PO给药途径，来那度胺的毒性剂量高达15，22.5和45mg/kg。由于在我们的PBS给药载体中的溶解度有限，这些最大可达到的来那度胺剂量具有良好的耐受性，除了在15mg/kg IV剂量下一只小鼠死亡（总共四次给药）。值得注意的是，在IV剂量15 mg/kg（n = 3）或10 mg/kg（n = 45）或任何其他剂量水平的IV，IP和PO途径中，没有观察到其他毒性[4] 。 细胞实验：细胞系NCI-H929和U266以及DF15细胞在含有补充有2mM谷氨酰胺的10％（V/V）热灭活的胎牛血清的RPMI-I640培养基中生长。为了产生来那度胺抗性细胞系，连续处理NCI-H929细胞（每3-4天加入新鲜的来那度胺），对照（最终0.1％DMSO）或低剂量来那度胺（1μM）2个月，直至细胞增殖。通过细胞活力（Vi-细胞XR细胞活力分析仪）测定，来那度胺（1μM）不再抑制，通过流式细胞术和细胞周期分析（碘化丙锭染色）进行细胞增殖。在获得1μM的抗性后，用来那度胺（10μM）处理抗性H929细胞系另外4个月。在这段时间之后，细胞培养物达到完全建立对高剂量来那度胺（30μM）的抗性。在此处描述的实验之前，将H929来那度胺抗性细胞在使用前从化合物中取出5-7天[3]。 动物实验：小鼠[4]使用8-10周龄的印迹对照区（ICR）小鼠。来那度胺在含有1％HCl的PBS中不完全溶解于3.5mg/mL及以上，因为在彻底混合后仍留下可见颗粒。因此，选择3mg/mL作为最大剂量溶液浓度（没有可见颗粒）。单个，单个小鼠最初给予3，10或15mg/kg IV; 4.5，15或22.5 mg/kg IP;和9，30或45毫克/千克PO。然后以Lenalidomide在给药溶液中的体积和溶解度可达到的最大剂量评估另外的小鼠（n = 4）。密切监测所有小鼠1小时，并在给药后3，6和24小时重新评估毒性[4]。 数据来源文献：[1]. Omran A， et al. Effects of MRP8， LPS， and lenalidomide on the expressions of TNF-α ， brain-enriched， and inflammation-related microRNAs in the primary astrocyte culture. ScientificWorldJournal. 2013 Sep 21;2013:208309. [2]. Kotla V， et al. Mechanism of action of lenalidomide in hematological malignancies. J Hematol Oncol. 2009 Aug 12;2:36. [3]. Lopez-Girona A， et al. Cereblon is a direct protein target for immunomodulatory and antiproliferative activities of lenalidomide and pomalidomide. Leukemia. 2012 Nov;26(11):2326-35. [4]. Rozewski DM， et al. Pharmacokinetics and tissue disposition of lenalidomide in mice. AAPS J. 2012 Dec;14(4):872-82. [5]. Minzel W， et al. Small Molecules Co-targeting CKIα and the Transcriptional Kinases CDK7/9 Control AML in Preclinical Models. Cell. 2018 Sep 20;175(1):171-185.e25. [6]. Nagashima， Takeyuki， et al. PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING BICYCLIC NITROGEN-CONTAINING AROMATIC HETEROCYCLIC AMIDE COMPOUND AS ACTIVE INGREDIENT. Patent. 20170360780A1
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