| 基本信息： | 中文名称：成脂诱导小分子化合物Kit-13（即用型，含油红O、罗格列酮） 英文名称：Adipogenic Differentiation Small Molecules Kit-13（Solution,With Rosiglitazone and Oil Red O Saturated Solution） 规格：1kit 储存条件：Stroe at -20℃，6 months. |
|---|
基本操作（仅供参考）
1.接种干细胞：取对数生长期的细胞，按照2×104cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO2培养环境下培养至融合度90-100%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液（含有地塞米松、胰岛素、IBMX和吲哚美辛/罗格列酮）。
2.细胞分化诱导：于37℃，5%CO2培养环境下培养约2-3天，更换为成脂诱导分化培养基维持液（只含有胰岛素）培养1天。
3.按照以上换液频率继续诱导（一般是3个循环，约14天左右），并注意观察细胞形态变化。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小，决定终止细胞诱导的时间，并进行染色鉴定。
4.细胞固定：吸去培养基,使用适量1×PBS清洗一次，弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室温固定30-60min，弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
5.油红O染色：加入适量工作液，静置染色30min；吸走油红O染色液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
6.诱导评估：显微镜下观察成脂染色效果，并进行图像采集和诱导评估；诱导成功时，脂滴会与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。
扫一扫关注我们
